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    脑膜炎球菌荚膜多糖氧乙酰基相关特性及其作用机理 认领
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    作者 刘英(综述) 刘方蕾(审校) 《微生物学免疫学进展》 2020年第1期82-86,共5页
    氧乙酰基(O-acetyl,OAc)存在于许多细菌多糖中,如脑膜炎球菌(meningococcus)A、C、W135、Y群荚膜多糖、大肠杆菌K1型荚膜多糖等均存在氧乙酰化修饰。由于荚膜多糖(capsular polysaccharides,CPS)中OAc的分布和占比被视为脑膜炎球菌多糖... 氧乙酰基(O-acetyl,OAc)存在于许多细菌多糖中,如脑膜炎球菌(meningococcus)A、C、W135、Y群荚膜多糖、大肠杆菌K1型荚膜多糖等均存在氧乙酰化修饰。由于荚膜多糖(capsular polysaccharides,CPS)中OAc的分布和占比被视为脑膜炎球菌多糖候选疫苗的关键质量控制因素,氧乙酰化修饰对多糖疫苗的免疫原性的重要作用,特别是脑膜炎球菌CPS OAc对其疫苗免疫原性的影响越来越受到关注。现就脑膜炎球菌CPS OAc的相关特性和检测方法、迁移因素、OAc修饰及其作用、OAc转移酶的作用机制、OAc对脑膜炎球菌免疫原性的影响作一概述,有助于脑膜炎球菌荚膜多糖疫苗安全性和免疫原性的评价。 展开更多
    关键词 脑膜炎球菌 荚膜多糖 氧乙酰基 机理
    b型流感嗜血杆菌荚膜多糖提取新工艺中Triton X-114残留含量的质量标准研究 认领
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    作者 朱文勇 欧阳圣洁 +4 位作者 代小虎 宋绍辉 寸怡娜 陈枫 廖国阳 《中国医药科学》 2020年第11期6-9,22,共5页
    目的验证苯酚法检测b型流感嗜血杆菌荚膜多糖提取新工艺中Triton X-114残留含量的可行性,并建立Triton X-114在Hib荚膜多糖中残留含量的质量标准。方法参考2015版《中国药典》三部中检测Triton X-100及相关文献中的苯酚法,对其线性范围... 目的验证苯酚法检测b型流感嗜血杆菌荚膜多糖提取新工艺中Triton X-114残留含量的可行性,并建立Triton X-114在Hib荚膜多糖中残留含量的质量标准。方法参考2015版《中国药典》三部中检测Triton X-100及相关文献中的苯酚法,对其线性范围、准确性、精密性进行验证,对多批次荚膜多糖的残留含量及对应的安全性结果进行统计归纳。结果苯酚法可以应用于b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中Triton X-114的残留量检测,其线性范围、准确性及精密性较好,经15批次荚膜多糖中数据统计,b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中Triton X-114的残留含量标准建议定为<25.00mg/g荚膜多糖。结论苯酚法可以有效检测Triton X-114在b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中的残留含量,本研究所制定质量标准可以保证产品的安全性。 展开更多
    关键词 B型流感嗜血杆菌 荚膜多糖 Triton X-114 检测 质量标准
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    肺炎克雷伯杆菌荚膜多糖经EGFR途径诱导支气管上皮细胞分泌细胞因子 认领
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    作者 肖非 曹二龙 +1 位作者 龙南彪 曾赛丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期514-518,共5页
    目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在肺炎克雷伯杆菌(KP)荚膜多糖(CPS)诱导人正常支气管上皮BEAS-2B细胞分泌炎性细胞因子中的作用。方法:体外培养KP并提取CPS,用不同浓度的CPS刺激BEAS-2B细胞,通过ELISA检测细胞上清中肿瘤坏死因子α(T... 目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在肺炎克雷伯杆菌(KP)荚膜多糖(CPS)诱导人正常支气管上皮BEAS-2B细胞分泌炎性细胞因子中的作用。方法:体外培养KP并提取CPS,用不同浓度的CPS刺激BEAS-2B细胞,通过ELISA检测细胞上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素8(IL-8)的水平,并于刺激后不同时点通过Western blot检测EGFR的磷酸化水平;EGFR抑制剂AG1478预处理BEAS-2B细胞后,Western blot检测ERK磷酸化水平,间接免疫荧光染色检测p65的核转位,并观察细胞上清中TNF-α和IL-8的变化情况;最后经ERK抑制剂PD98059和NF-κB抑制剂PDTC分别预处理后用CPS刺激细胞,ELISA检测细胞上清中TNF-α和IL-8的水平。结果:10 mg/L CPS刺激BEAS-2B细胞12 h能够显著诱导其分泌TNF-α和IL-8;Western blot和间接免疫荧光染色检测结果显示,CPS刺激可显著诱导BEAS-2B细胞中EGFR和ERK的磷酸化及p65的核转位。经EGFR抑制剂AG1478预处理细胞后,ERK的磷酸化水平显著降低,NF-κB的核转位减少;而在EGFR、ERK及NF-κB抑制剂预处理的细胞的上清中,TNF-α和IL-8分泌水平均明显降低(P<0.05)。结论:肺炎克雷伯杆菌荚膜多糖能够通过EGFR激活ERK和NF-κB信号通路,进而诱导人正常支气管上皮细胞分泌炎性细胞因子TNF-α和IL-8,提示EGFR可能是KP感染引起炎症反应的关键因子。 展开更多
    关键词 肺炎克雷伯杆菌 荚膜多糖 表皮生长因子受体 细胞因子 炎症反应
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    6群肺炎链球菌新亚型的研究现状 认领
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    作者 刘尊杰 周林 杨永弘 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2020年第7期532-535,共4页
    6群肺炎链球菌是导致儿童社区感染的常见血清群之一,既往采用荚膜肿胀实验将6群分为6A和6B 2个亚型。随着基因测序分型方法的应用,近年来又发现了6C、6D、6E、6F和6H等新的亚型。肺炎链球菌结合疫苗(PCV)7应用后的国家或地区监测到6C型... 6群肺炎链球菌是导致儿童社区感染的常见血清群之一,既往采用荚膜肿胀实验将6群分为6A和6B 2个亚型。随着基因测序分型方法的应用,近年来又发现了6C、6D、6E、6F和6H等新的亚型。肺炎链球菌结合疫苗(PCV)7应用后的国家或地区监测到6C型呈增长的趋势,应引起重视。现就6群肺炎链球菌新亚型的荚膜多糖合成基因、荚膜多糖结构、耐药性及分子流行病学进行阐述。 展开更多
    关键词 肺炎链球菌 血清型 抗生素耐药 多位点序列分型 荚膜多糖
    5型肺炎球菌荚膜多糖无乙醇无苯酚纯化工艺的建立 认领
    5
    作者 任克明 王玺 +8 位作者 张轶 张新庄 张丽芝 白贵杰 李阿妮 刘倩 王剑虹 沈荣 罗树权 《微生物学免疫学进展》 2020年第1期24-29,共6页
    目的建立一种无乙醇无苯酚的5型肺炎球菌荚膜多糖纯化工艺,并进行工艺验证。方法5型肺炎球菌发酵培养液采用脱氧胆酸钠法去除蛋白质,再利用层析法去除核酸等杂质,并对去除蛋白质工艺、层析工艺分别进行优化。采用优化后的方法纯化3批5... 目的建立一种无乙醇无苯酚的5型肺炎球菌荚膜多糖纯化工艺,并进行工艺验证。方法5型肺炎球菌发酵培养液采用脱氧胆酸钠法去除蛋白质,再利用层析法去除核酸等杂质,并对去除蛋白质工艺、层析工艺分别进行优化。采用优化后的方法纯化3批5型肺炎球菌发酵培养液,并对新工艺进行验证。结果去除蛋白质工艺的最适参数为:脱氧胆酸钠体积分数为0.5%,pH 4.3;层析工艺的最佳条件为:氯化钠浓度200 mmol/L,pH 8.0,上样流速150 cm/h,多糖质量浓度0.50 mg/mL。在上述工艺条件下,纯化的荚膜多糖各项指标均符合《欧洲药典》9.0版标准。结论该工艺稳定、可靠,可用于大规模生产,相比于传统的乙醇苯酚纯化工艺具有先进性。 展开更多
    关键词 肺炎球菌 荚膜多糖 纯化工艺
    高毒力肺炎克雷伯菌分子致病机制研究进展 认领 被引量:1
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    作者 张颖 李轶(综述) 郭思(审校) 《检验医学与临床》 CAS 2020年第9期1298-1301,共4页
    882年,肺炎克雷伯菌(KP)首次从死于肺炎的患者的肺中被分离出来[1]。KP属于肠杆菌科,是人类胃肠道菌群的一部分。它们携带多种毒力基因,并且具有获得抗菌药物抗性基因的能力,同时可以引起局部和播散性感染[2],是临床常见的条件致病菌之... 882年,肺炎克雷伯菌(KP)首次从死于肺炎的患者的肺中被分离出来[1]。KP属于肠杆菌科,是人类胃肠道菌群的一部分。它们携带多种毒力基因,并且具有获得抗菌药物抗性基因的能力,同时可以引起局部和播散性感染[2],是临床常见的条件致病菌之一。大多数“经典”肺炎克雷伯菌(cKP)能够引起肺炎、尿路感染、腹腔感染、血管内装置感染、手术部位感染、软组织感染、菌血症等,常发生于住院需长期护理或免疫功能低下的患者. 展开更多
    关键词 高毒力 肺炎克雷伯菌 铁载体 荚膜多糖 菌毛 毒力因子
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    新型隐球菌荚膜多糖对肺隐球菌病的诊断价值 认领
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    作者 卜丹霞 杨春超 +1 位作者 黄云平 冼观秀 《黑龙江医学》 2020年第2期166-168,共3页
    目的探讨新型隐球菌荚膜多糖对肺隐球菌病(PCD)的诊断价值。方法选取2017年1月-2018年12月湛江中心人民医院收治的疑似PCD患者83例,入院后治疗前均行血清乳胶凝集试验(LAT)检测新型隐球菌荚膜多糖、肺组织镜检及培养、肺组织病理检查。... 目的探讨新型隐球菌荚膜多糖对肺隐球菌病(PCD)的诊断价值。方法选取2017年1月-2018年12月湛江中心人民医院收治的疑似PCD患者83例,入院后治疗前均行血清乳胶凝集试验(LAT)检测新型隐球菌荚膜多糖、肺组织镜检及培养、肺组织病理检查。根据PCD诊断金标准,观察3种检测方法对PCD的检测结果,比较3种检测方法对PCD的准确性、敏感性和特异性。结果 LAT对PCD的准确性、敏感性明显高于肺组织镜检及培养、肺组织病理检查,差异有统计学意义(P<0.05);3种检测方法对PCD的特异性均较高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论新型隐球菌荚膜多糖检测应用于PCD的诊断中具有准确率高、快速简便的特点,可作为该病早期辅助诊断方法,具有较高的临床应用价值。 展开更多
    关键词 新型隐球菌 荚膜多糖 肺隐球菌病
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    荚膜多糖抗原检测在不同免疫状态肺隐球菌病患者中的敏感性差异 认领
    8
    作者 张丽琴 邹坚 +3 位作者 徐玉辉 刘聪 刘婷 邹淑慧 《首都食品与医药》 2020年第23期105-106,共2页
    目的探究荚膜多糖抗原检测在不同免疫状态肺隐球菌病(PC)患者中的敏感性差异.方法选取2017年1月~2019年12月感染PC患者30例,依据不同免疫状态分为免疫抑制组和非免疫抑制组,对比两组患者的实验室检查结果、病理学检查结果、荚膜多糖抗... 目的探究荚膜多糖抗原检测在不同免疫状态肺隐球菌病(PC)患者中的敏感性差异.方法选取2017年1月~2019年12月感染PC患者30例,依据不同免疫状态分为免疫抑制组和非免疫抑制组,对比两组患者的实验室检查结果、病理学检查结果、荚膜多糖抗原检测结果,以及检测方法的灵敏性和准确性.结果两组间白细胞计数、红细胞沉降率和C反应蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05).免疫抑制组CD3+CD4+水平显著低于非免疫抑制组(P<0.05);两组患者病理类型的构成比无显著性差异;免疫抑制组CrAg水平在3.2μg/L以上者11例,占比91.67%,非免疫抑制组CrAg水平在3.2μg/L以上者占比88.89%,免疫抑制组与非免疫抑制组无显著性差异(P<0.05);荚膜多糖抗原检测肺隐球菌病患者灵敏性为92.59%,准确性为83.33%.结论免疫抑制患者并发PC时实验室检查与非免疫抑制患者相比差异不明显,病理组织学改变中黏液胶样型多于非免疫抑制患者,免疫抑制PC患者的CrAg水平与非免疫抑制PC患者间无显著性差异,该诊断方法灵敏度高、准确度高,建议进行临床推广. 展开更多
    关键词 荚膜多糖 酶联免疫 肺隐球菌病
    新型肺炎球菌荚膜多糖纯化方法的建立 认领
    9
    作者 任克明 白贵杰 +8 位作者 张丽芝 李阿妮 刘倩 张轶 王玺 张新庄 王剑虹 罗树权 沈荣 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第10期1181-1185,共5页
    目的建立一种无乙醇、无苯酚的新型肺炎球菌荚膜多糖纯化方法。方法以1型、6B型、14型肺炎球菌为模式样品,将发酵培养液依次用脱氧胆酸钠和核酸酶进行处理,以实现荚膜多糖与杂质的分离。再将此工艺应用于其他型别肺炎球菌发酵培养液纯化... 目的建立一种无乙醇、无苯酚的新型肺炎球菌荚膜多糖纯化方法。方法以1型、6B型、14型肺炎球菌为模式样品,将发酵培养液依次用脱氧胆酸钠和核酸酶进行处理,以实现荚膜多糖与杂质的分离。再将此工艺应用于其他型别肺炎球菌发酵培养液纯化,获得纯化荚膜多糖。结果1型、6B型、14型肺炎球菌在纯化过程中核酸、蛋白的去除率均在99%以上,多糖回收率高于80%。应用此方法纯化的各型荚膜多糖各项指标均符合《欧洲药典》9.0版标准。结论该纯化方法适用于肺炎球菌荚膜多糖的规模化生产,且无血清型别限制,可替代传统的乙醇苯酚纯化工艺。 展开更多
    关键词 肺炎球菌 荚膜多糖 纯化 乙醇 苯酚
    19F型肺炎链球菌菌种的复壮及其荚膜多糖纯化工艺的优化 认领
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    作者 陈元芬 陈道远 +7 位作者 吴强 范杨艳 陶杨 张堃 王学 马礼耕 文彬 刘思麟 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第3期316-320,333共6页
    目的开发复壮肺炎链球菌19F型(Sreptococcus pneumoniae serotype 19F,简称PN19F)菌种的方法,并优化其荚膜多糖的纯化工艺。方法配制PN19F菌种用液体扩增培养基和固体选择培养基,筛选出荚膜较厚的单菌落,比较复壮前后PN19F菌种的发酵培... 目的开发复壮肺炎链球菌19F型(Sreptococcus pneumoniae serotype 19F,简称PN19F)菌种的方法,并优化其荚膜多糖的纯化工艺。方法配制PN19F菌种用液体扩增培养基和固体选择培养基,筛选出荚膜较厚的单菌落,比较复壮前后PN19F菌种的发酵培养情况、纯化后多糖收获量及多糖质量;将发酵液裂解后分别酸沉淀8、24和48 h,并经100 KD超滤纯化,再分别用乙醇法和冻干法制备精制多糖,比较其多糖收获量、组分检定结果、抗原活性、核磁共振图谱。结果两种培养基复壮前后的PN19F菌种,发酵收获菌液A600值及培养时间变化不大。纯化后多糖收获量分别为0. 2和0. 6 g/L,即复壮后多糖收率提高了195%。酸沉淀8、24 h后纯化的多糖质量合格,且24 h较8 h多糖收率高约38%,酸沉淀时间达48 h时,产率无明显变化,但多糖质量不合格。乙醇法和冻干法制备的精制多糖各项指标均合格,且无明显差异。结论应用制备的两种培养基复壮的PN19F菌种,可明显提高荚膜多糖产量。PN19F菌种的酸沉淀时间不超过24 h,乙醇法和冻干法均可用于精制多糖制备。 展开更多
    关键词 肺炎链球菌 复壮 荚膜多糖 纯化
    A群脑膜炎球菌发酵工艺的优化 认领
    11
    作者 安建科 郑喆 +5 位作者 王倩 董继刚 冯君平 喻大鑫 马国荣 杜送田 《西北民族大学学报:自然科学版》 2020年第1期45-49,共5页
    目的:优化A群脑膜炎球菌的发酵工艺,提高荚膜多糖产量.方法:在30 L发酵罐中,通过调整溶氧(DO)、pH值、培养温度、接种终浓度、葡萄糖补料方式等变化,考察其对A群脑膜炎球菌菌体生长及荚膜多糖产量的影响,优化发酵工艺.结果:在发酵过程中... 目的:优化A群脑膜炎球菌的发酵工艺,提高荚膜多糖产量.方法:在30 L发酵罐中,通过调整溶氧(DO)、pH值、培养温度、接种终浓度、葡萄糖补料方式等变化,考察其对A群脑膜炎球菌菌体生长及荚膜多糖产量的影响,优化发酵工艺.结果:在发酵过程中,DO在10%~20%范围内对多糖合成无明显影响;在pH7.0,培养温度36℃,有利于多糖合成;发酵中间补加葡萄糖可增加多糖合成,固定速率补糖更有利于多糖合成.结论:通过参数优化,确定了A群脑膜炎球菌的最佳发酵工艺. 展开更多
    关键词 脑膜炎球菌 A群 发酵 荚膜多糖
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    人工合成糖疫苗的研究进展与发展趋势 认领
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    作者 李格非 熊德彩 叶新山 《药学进展》 CAS 2020年第7期512-520,共9页
    糖化学及糖化学生物学的快速发展促使糖疫苗的研究取得了一系列重要成果,尤其在应对致命性疾病例如肿瘤和艾滋病的威胁方面,提供了新的防治方案。然而,在解决免疫耐受和实现结构均一性糖链的大规模合成之前,糖疫苗距离临床应用还有一定... 糖化学及糖化学生物学的快速发展促使糖疫苗的研究取得了一系列重要成果,尤其在应对致命性疾病例如肿瘤和艾滋病的威胁方面,提供了新的防治方案。然而,在解决免疫耐受和实现结构均一性糖链的大规模合成之前,糖疫苗距离临床应用还有一定的距离。综述糖疫苗近期研究成果,介绍糖疫苗在应对细菌感染性疾病、艾滋病和肿瘤方面所取得的进展以及面临的挑战,以期为糖科学研究和新疫苗的开发提供思路。 展开更多
    关键词 糖疫苗 肿瘤疫苗 荚膜多糖 细菌多糖疫苗
    SPLUNC1负向调控肺炎克雷伯菌夹膜多糖诱导细胞因子分泌 认领
    13
    作者 曹二龙 谭潇 +3 位作者 刘选梅 肖非 马婷 贺印旎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第22期2711-2714,共4页
    目的:观察肺炎克雷伯菌夹膜多糖(CPS)对人肺上皮细胞表达短腭、肺及鼻咽上皮克隆1(SPLUNC1)的影响,并探讨其在介导细胞因子分泌中的作用。方法:培养肺炎克雷伯菌并提取其CPS,将其与体外培养人肺上皮细胞系NCI-H292孵育。实时定量PCR和EL... 目的:观察肺炎克雷伯菌夹膜多糖(CPS)对人肺上皮细胞表达短腭、肺及鼻咽上皮克隆1(SPLUNC1)的影响,并探讨其在介导细胞因子分泌中的作用。方法:培养肺炎克雷伯菌并提取其CPS,将其与体外培养人肺上皮细胞系NCI-H292孵育。实时定量PCR和ELISA检测SPLUNC1蛋白和mRNA表达的影响。提取细胞核蛋白,ELISA测定CPS处理前后NF-κB活性的变化,采用Western blot检测IκB的表达,并采用NF-κB抑制剂PDTC预处理,观察其在SPLUNC1表达中的作用。ELISA检测CPS处理前后培养上清TNF-α和IL-8分泌的变化;并采用siRNA沉默NCI-H292细胞SPLUNC1,观察其对TNF-α和IL-8分泌的影响。结果:实时定量PCR结果显示,0.5~3μg/ml CPS处理后,SPLUNC1 mRNA水平明显增高,并呈一定的剂量依赖性,ELISA也得到了类似的结果。0.5~3μg/ml CPS也能激活NF-κB,主要表现在NF-κB的DNA结合活性增高、IκB表达减少。同时,CPS也能诱导肺上皮细胞分泌TNF-α和IL-8,采用NF-κB抑制剂PDTC预处理细胞后,细胞因子分泌明显减少。此外,采用siRNA沉默SPLUNC1表达后,TNF-α和IL-8的分泌有所增多。结论:肺炎克雷伯菌夹膜多糖可经激活NF-κB诱导人肺上皮细胞系表达SPLUNC1,后者能在一定程度上负向调控TNF-α和IL-8分泌。 展开更多
    关键词 肺炎克雷伯菌 荚膜多糖 细胞因子
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    基于QbD理念优化5型肺炎球菌荚膜多糖层析纯化工艺及验证 认领
    14
    作者 任克明 宋宪铭 +8 位作者 张轶 王玺 张丽芝 张新庄 任珍芸 白贵杰 王剑虹 沈荣 罗树权 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第12期1395-1401,共7页
    目的 基于质量源于设计(quality by design,QbD)理念优化并验证5型肺炎球菌荚膜多糖层析纯化工艺的设计空间。方法 以样品处理量(sample handling capacity,SHC)、多糖回收率(polysaccharide recovery rate,PRR)为关键质量属性(critical... 目的 基于质量源于设计(quality by design,QbD)理念优化并验证5型肺炎球菌荚膜多糖层析纯化工艺的设计空间。方法 以样品处理量(sample handling capacity,SHC)、多糖回收率(polysaccharide recovery rate,PRR)为关键质量属性(critical quality attributes,CQAs),通过部分析因试验确定p H、氯化钠浓度、多糖浓度为关键工艺参数(critical process parameters,CPPs),再通过Box-Behnken设计优化CPPs,基于二次多项式回归模型建立设计空间,并进行验证。结果 方差分析结果显示,模型的P均<0. 000 1,且失拟值均>0.05,表明该模型可较好地描述CQAs和CPPs之间的关系。最终获得的操作空间为:pH 7.7~7.9,氯化钠浓度220~280 mmol/L,多糖浓度1~1.6 mg/mL。结论 基于Qb D理念优化的5型肺炎球菌荚膜多糖层析纯化工艺设计空间可提高工艺过程的稳健性和灵活性。 展开更多
    关键词 质量源于设计 肺炎球菌 荚膜多糖 层析 纯化
    W135群脑膜炎球菌发酵培养条件的优化 认领
    15
    作者 周晖国 任静 +4 位作者 徐世友 吴元元 张生琰 杨千苇 于飞飞 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第12期1421-1424,共4页
    目的优化W135群脑膜炎球菌发酵培养条件,提高荚膜多糖产量。方法通过30 L发酵罐培养W135群脑膜炎球菌,分析不同补加葡萄糖方式、发酵温度、接种量对发酵液中生物量和荚膜多糖产量的影响,优化培养条件;并对优化的工艺进行验证。结果 W13... 目的优化W135群脑膜炎球菌发酵培养条件,提高荚膜多糖产量。方法通过30 L发酵罐培养W135群脑膜炎球菌,分析不同补加葡萄糖方式、发酵温度、接种量对发酵液中生物量和荚膜多糖产量的影响,优化培养条件;并对优化的工艺进行验证。结果 W135群脑膜炎球菌发酵培养优化条件为分批补加5 g/L葡萄糖,发酵温度为37℃,接种量为16%;2批W135群脑膜炎球菌精制多糖的核酸含量、蛋白含量、唾液酸含量、O-乙酰基含量、K_D值、回收率及多糖含量,均符合ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗质量标准。结论获得了更适宜W135群脑膜炎球菌的发酵培养条件,提高了荚膜多糖含量,为建立完整的发酵工艺奠定了实验基础。 展开更多
    关键词 脑膜炎球菌 发酵 培养条件 荚膜多糖
    Y 群脑膜炎球菌结合物制备过程中荚膜多糖水解条件的优化 认领
    16
    作者 杨明 刘方蕾 +7 位作者 孔素娟 刘月萍 杨淼 马钰 李阿妮 高晶晶 谭小梅 罗树权 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第10期1108-1111,共4页
    目的对Y群脑膜炎球菌结合物制备过程中荚膜多糖水解条件进行优化,确定水解反应参数,以适用于后续结合物制备。方法分别使用双氧水(H2O2)和冰醋酸2种水解反应试剂,在不同浓度(H2O2分别至终浓度1%和2%,冰醋酸分别至终浓度0.05和0.1 mol/L... 目的对Y群脑膜炎球菌结合物制备过程中荚膜多糖水解条件进行优化,确定水解反应参数,以适用于后续结合物制备。方法分别使用双氧水(H2O2)和冰醋酸2种水解反应试剂,在不同浓度(H2O2分别至终浓度1%和2%,冰醋酸分别至终浓度0.05和0.1 mol/L)、不同温度(37和50℃)下反应不同时间,比较水解物的分子大小;采用确定的工艺参数连续制备3批多糖水解物,检测分子大小、O-乙酰基含量,并进行结构确认和抗原性分析。结果确定了Y群脑膜炎球菌多糖水解反应参数为:水解试剂冰醋酸,水解反应温度37℃,冰醋酸终浓度0.05 mol/L,反应时间3 h。采用以上反应参数制备的3批多糖水解物在结构、特异基团及抗原性等方面完好地保留了多糖的特性,且分子大小适宜、批件一致性良好。结论优化的Y群脑膜炎球菌荚膜多糖水解反应参数可应用于多糖水解物制备,为后续稳定制备合格结合物提供了保障。 展开更多
    关键词 Y群脑膜炎球菌 荚膜多糖 水解 冰醋酸
    不同酸水解酪蛋白对W135群和Y群脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖产量的影响 认领
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    作者 白贵杰 张新庄 +8 位作者 张丽芝 杨田瑶 任克明 张轶 侯亚莉 王晶 刘方蕾 罗树权 沈荣 《微生物学免疫学进展》 2019年第3期27-31,共5页
    目的 探索不同酸水解酪蛋白对W135群与Y群脑膜炎奈瑟菌(脑膜炎球菌)荚膜多糖产量的影响。方法 分别以NaCl质量分数为37%和14%的酸水解酪蛋白作为有机氮源配制改良半综合高盐培养基和低盐培养基,利用全自动细菌发酵罐分别在两种培养基里... 目的 探索不同酸水解酪蛋白对W135群与Y群脑膜炎奈瑟菌(脑膜炎球菌)荚膜多糖产量的影响。方法 分别以NaCl质量分数为37%和14%的酸水解酪蛋白作为有机氮源配制改良半综合高盐培养基和低盐培养基,利用全自动细菌发酵罐分别在两种培养基里培养W135群和Y群脑膜炎球菌,比较这两种菌株在两种培养基中的生长时间、收获液菌密度( A 600 nm 值)、收获液去菌体后与去复合多糖后上清中的荚膜多糖含量,以及纯化后的精糖产量;比较高盐培养基收获液及其2倍稀释液中不同终含量的十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide, CTAB)溶液对多糖沉淀效果的影响。结果 W135群与Y群脑膜炎球菌在两种培养基中的培养时间差异无统计学意义( P >0.05),但高盐培养基收获液的菌密度、收获液去菌体后上清液中的多糖含量均高于低盐培养基收获液,差异有统计学意义( P < 0.05),而高盐培养基收获液纯化后的精糖产量低于低盐培养基,差异有统计学意义( P <0.05)。高盐培养液2倍稀释后,在CTAB终体积分数为0.04%时,W135群与Y群脑膜炎球菌多糖全部沉淀,而未稀释高盐培养液即使CTAB终体积分数提高到0.14%,依然也不能完全沉淀 W135群与Y群脑膜炎球菌多糖。结论 不同酸水解酪蛋白对W135群和Y群脑膜炎球菌的生长密度和荚膜多糖产量有影响,用CTAB溶液沉淀荚膜多糖时需控制收获液盐含量。 展开更多
    关键词 脑膜炎球菌 酸水解酪蛋白 荚膜多糖 十六烷基三甲基溴化铵
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    b型流感嗜血杆菌荚膜多糖定量~1H-NMR法的建立及验证 认领
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    作者 许美凤 毛琦琦 +4 位作者 赵丹 陈苏京 李亚南 李茂光 叶强 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第9期1010-1014,1019共6页
    目的建立测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖绝对含量的定量1H核磁共振法(nuclear magnetic resonance,NMR,即1H-NMR法),并进行验证。方法精密称取Hib荚膜多糖粉末,重水溶解,配制一定浓度的供试品多糖溶液... 目的建立测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖绝对含量的定量1H核磁共振法(nuclear magnetic resonance,NMR,即1H-NMR法),并进行验证。方法精密称取Hib荚膜多糖粉末,重水溶解,配制一定浓度的供试品多糖溶液;采用Bruker Avance-600型超导核磁共振波谱仪,设置NMR实验参数条件,以重水为溶剂,二甲基砜为内标物建立定量1H-NMR法进行多糖含量测定;对该方法进行专属性、准确度、线性、精密度及耐用性验证;应用建立的定量1H-NMR法及化学法测定5批Hib荚膜多糖含量。结果经1H-NMR谱、13C-NMR谱、1H-1H COSY谱及1H-13C HSQC谱归属显示,Hib荚膜多糖的定量峰(δH5. 06)及内标物二甲基砜的定量峰(δH3. 14)分离良好,互不干扰,且不受样品内其他谱峰的干扰,方法专属性良好;供试品溶液加入100、150及200μL国际标准品,加标回收率在101%~102%;Hib多糖质量浓度在1~20 mg/mL范围,线性方程为y=0. 234 3 x-0. 002 6(R2=1. 000 0);供试品溶液6次重复性及中间精密度测定的定量峰积分面积比值的RSD分别为0. 78%及0. 60%,精密度良好;5 mg/mL的供试品溶液在不同脉冲角度及不同延迟时间定量峰积分面积比的RSD分别为0. 07%及0. 13%,耐用性良好。5批荚膜多糖经定量1H-NMR法及化学法检测,核糖含量均在《中国药典》三部(2015版)规定合格范围内(320~410 mg/g)。结论成功建立了测定Hib荚膜多糖含量的定量1H-NMR法,该方法具有良好的专属性、准确度、线性、精密度及耐用性,为Hib疫苗的质量控制研究奠定了基础。 展开更多
    关键词 B型流感嗜血杆菌 荚膜多糖 定量~1H-NMR法 二甲基砜
    W135群脑膜炎球菌培养基优化 认领
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    作者 吴元元 张生琰 +4 位作者 周晖国 孙燕 徐世友 杨千苇 于飞飞 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第11期1275-1280,1286共7页
    目的试验设计法优化W135群脑膜炎球菌培养基,以期提高荚膜多糖产量。方法配制流脑半综合培养基(1、2、3号)及改良TSB培养基,以W135群脑膜炎球菌为试验菌株,菌密度为响应值,采用全因子试验、最陡爬坡试验、中心组合设计及响应面分析试验... 目的试验设计法优化W135群脑膜炎球菌培养基,以期提高荚膜多糖产量。方法配制流脑半综合培养基(1、2、3号)及改良TSB培养基,以W135群脑膜炎球菌为试验菌株,菌密度为响应值,采用全因子试验、最陡爬坡试验、中心组合设计及响应面分析试验对碳氮比进行优化,采用正交试验对硫酸镁、氯化钙、L-胱氨酸、氯化铵、谷氨酸钠、硫酸亚铁6种培养基添加成分进行筛选及优化。结果1号流脑半综合培养基确定为基础培养基;葡萄糖及酸水解酪蛋白为影响菌密度的主效应因素,两者的最适浓度为7.84和10.04 g/L;培养基6种添加成分对W135群脑膜炎球菌生长影响作用大小依次为硫酸镁、L-胱氨酸、硫酸亚铁、氯化铵、氯化钙、谷氨酸钠。优化的1号流脑半综合培养基不仅成分更加简单,且提高了W135群脑膜炎球菌密度。结论优化的培养基增加了W135群脑膜炎球菌密度,为荚膜多糖产量的提高奠定了基础。 展开更多
    关键词 W135群脑膜炎球菌 培养基 试验设计 荚膜多糖
    水貂肺炎二联苗制备及免疫效果评价 认领
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    作者 赵斌 张敏敏 +3 位作者 苏子涵 孙凯 藏萃妮 孙璐瑶 《中国畜禽种业》 2019年第5期95-97,共3页
    目前水貂肺炎主要以铜绿假单胞菌、克雷伯氏菌为主,常于水貂换毛期时暴发性流行,且多呈混合感染。本文针对水貂肺炎面临的突出问题,根据国内外肺炎疫苗的研究进展与市面疫苗对水貂的保护情况,探索克雷伯荚膜多糖作为佐剂及其与铜绿假单... 目前水貂肺炎主要以铜绿假单胞菌、克雷伯氏菌为主,常于水貂换毛期时暴发性流行,且多呈混合感染。本文针对水貂肺炎面临的突出问题,根据国内外肺炎疫苗的研究进展与市面疫苗对水貂的保护情况,探索克雷伯荚膜多糖作为佐剂及其与铜绿假单胞菌制备二联苗对水貂保护。通过免疫小鼠产生抗体水平与特异性分泌细胞评价结果表明,荚膜多糖对铜绿假单胞菌抗原具有良好佐剂效用,但效果低于氢氧化铝佐剂。荚膜多糖是肺炎克雷伯良好抗原,能产生较高抗体。铜绿假单胞菌菌体疫苗与铜绿假单胞菌上清液疫苗抗体水平无显著差异。 展开更多
    关键词 BALB/C小鼠 铜绿假单胞菌 荚膜多糖 免疫效果评价
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